CtIP fusion to Cas9 enhances transgene integration by homology-dependent repair
| العنوان: | CtIP fusion to Cas9 enhances transgene integration by homology-dependent repair |
|---|---|
| المؤلفون: | Charpentier, M., Khedher, A., Menoret, S., Brion, A., Lamribet, K., Dardillac, E., Boix, C., Perrouault, L., Tesson, L., Geny, S., De Cian, A., Itier, J, Anegon, I., Lopez, B., Giovannangeli, C., Concordet, J. |
| المساهمون: | Structure et Instabilité des Génomes (STRING), Muséum national d'Histoire naturelle (MNHN)-Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM)-Institut de Chimie du CNRS (INC)-Sorbonne Université (SU)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), Translational Sciences [Paris] (SANOFI), SANOFI Recherche, Genetic and Cellular Engineering in Immunology and Regenerative Medicine (Team 2 - U1064 Inserm - CRTI), Centre de Recherche en Transplantation et Immunologie (U1064 Inserm - CRTI), Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM)-Université de Nantes - UFR de Médecine et des Techniques Médicales (UFR MEDECINE), Université de Nantes (UN)-Université de Nantes (UN)-Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM)-Université de Nantes - UFR de Médecine et des Techniques Médicales (UFR MEDECINE), Université de Nantes (UN)-Université de Nantes (UN), Stabilité Génétique et Oncogenèse (UMR 8200), Université Paris-Sud - Paris 11 (UP11)-Institut Gustave Roussy (IGR)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), ANRT, ANR-11-INBS-0014,TEFOR,Transgenèse pour les Etudes Fonctionnelles sur les Organismes modèles(2011), ANR-16-CE18-0012,STaHR,Stimulation de la Recombinaison Homologue pour la Thérapie Génique(2016), ANR-14-LAB5-0008,SOURIRAT,Nouveaux outils pour la création de rongeurs génétiquement modifiés(2014), ANR-11-LABX-0016,IGO,Immunothérapies Grand Ouest(2011), ANR-10-IBHU-0005,CESTI (TSI-IHU),Centre Européen des Sciences de la Transplantation et de l'Immunothérapie (TSI-IHU)(2010), Le Bihan, Sylvie, Infrastructures - Transgenèse pour les Etudes Fonctionnelles sur les Organismes modèles - - TEFOR2011 - ANR-11-INBS-0014 - INBS - VALID, Stimulation de la Recombinaison Homologue pour la Thérapie Génique - - STaHR2016 - ANR-16-CE18-0012 - AAPG2016 - VALID, Laboratoires communs organismes de recherche publics – PME/ETI - Nouveaux outils pour la création de rongeurs génétiquement modifiés - - SOURIRAT2014 - ANR-14-LAB5-0008 - LABCOM - VALID, Laboratoires d'excellence - Immunothérapies Grand Ouest - - IGO2011 - ANR-11-LABX-0016 - LABX - VALID, Instituts Hospitalo-Universitaires B - Centre Européen des Sciences de la Transplantation et de l'Immunothérapie (TSI-IHU) - - CESTI (TSI-IHU)2010 - ANR-10-IBHU-0005 - IBHU - VALID |
| المصدر: | Nature Communications, Vol 9, Iss 1, Pp 1-11 (2018) Nature Communications Nature Communications, Nature Publishing Group, 2018, 9 (1), ⟨10.1038/s41467-018-03475-7⟩ Nature Communications, 2018, 9 (1), ⟨10.1038/s41467-018-03475-7⟩ |
| بيانات النشر: | Nature Publishing Group, 2018. |
| سنة النشر: | 2018 |
| مصطلحات موضوعية: | [SDV.MHEP] Life Sciences [q-bio]/Human health and pathology, Science, lcsh:Q, lcsh:Science, [SDV.MHEP]Life Sciences [q-bio]/Human health and pathology |
| الوصف: | International audience; In genome editing with CRISPR-Cas9, transgene integration often remains challenging. Here, we present an approach for increasing the efficiency of transgene integration by homology-dependent repair (HDR). CtIP, a key protein in early steps of homologous recombination, is fused to Cas9 and stimulates transgene integration by HDR at the human AAVS1 safe harbor locus. A minimal N-terminal fragment of CtIP, designated HE for HDR enhancer, is sufficient to stimulate HDR and this depends on CDK phosphorylation sites and the multimerization domain essential for CtIP activity in homologous recombination. HDR stimulation by Cas9-HE, however, depends on the guide RNA used, a limitation that may be overcome by testing multiple guides to the locus of interest. The Cas9-HE fusion is simple to use and allows obtaining twofold or more efficient transgene integration than that with Cas9 in several experimental systems, including human cell lines, iPS cells, and rat zygotes. |
| وصف الملف: | application/pdf |
| اللغة: | English |
| تدمد: | 2041-1723 |
| URL الوصول: | https://explore.openaire.eu/search/publication?articleId=dedup_wf_001::d30b3a36c3a0ea402befc6e8e3043960 http://link.springer.com/article/10.1038/s41467-018-03475-7 |
| حقوق: | OPEN |
| رقم الأكسشن: | edsair.dedup.wf.001..d30b3a36c3a0ea402befc6e8e3043960 |
| قاعدة البيانات: | OpenAIRE |
| تدمد: | 20411723 |
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