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Introduction L’erythropoietine carbamylee (CEPO), denuee d’effets hematologiques deleteres, possede des proprietes neuroprotectrices anti-œdemateuses (d’action meconnue) dans les modeles de traumatisme crânien (TC) [1] . L’aquaporine 4 (AQP4) est une proteine cerebrale tel un canal a eau presente au niveau de la barriere hemato-encephalique. Son role dans la genese et l’evacuation de l’œdeme cerebral (OC) est discute au sein d’une litterature divergente. Nous formulons l’hypothese que l’effet anti-œdemateux de la CEPO pourrait etre medie par une modulation de l’expression et de la localisation des AQP4. Materiel et methodes Cinq groupes de rats Wistar mâles ont ete anesthesies et inclus dans un modele de TC diffus (de type impact acceleration). Les animaux recevaient 30 minutes apres le TC : – de la CEPO a la dose de 50 μg/kg ; – ou du serum physiologique (TC saline) ; – ou un inhibiteur des AQP4, le PMA [2] (phorbol 12-myristate 13-acetate) a la dose de 200 μg/kg/2 heures ; – ou son vehicule le DMSO (dimethylsulfoxide) ; – le groupe Sham n’avait pas de TC (controle). Les rats beneficiaient d’une IRM pre-TC, a H1, H2, puis etaient sacrifies et leur cerveau extrait. Trois series d’experimentation etaient conduites : analyse de l’OC en IRM de diffusion par comparaison des variations d’ADC (coefficient apparent de diffusion), etude de l’expression des AQP4 en RT-PCR et en immunofluorescence (IF) a H2. Resultats (1) Analyse de l’OC en IRM de diffusion ( n = 39 rats). La comparaison de l’ADC entre l’IRM pre-TC et a H2 (Δ ADC) montrait un œdeme post-TC : diminution de l’ADC dans le groupe TC saline (Δ ADC −7,74 % ± 2,7) vs Sham (0,26 % ± 3,4) p p p = 0,01. (2) Expression des AQP4 en RT-PCR a H2 post-TC ( n = 35). On notait une tendance a l’augmentation de l’expression de l’ARNm dans le groupe TC saline vs Sham, et encore plus importante dans le groupe TC CEPO vs Sham ( p = 0,07). Le PMA inhibait l’expression des AQP4 ( p = 0,05). (3) Expression et localisation des AQP4 en IF a H2 post-TC ( n = 28). On observait l’apparition d’un immuno-marquage des AQP4 au niveau capillaire dans les groupes TC, non present chez les Sham et une augmentation du marquage chez les TC CEPO par rapport aux TC saline ( Fig. 1 ). Aucun marquage n’etait observe dans le groupe TC PMA. Le marquage vasculaire etait inchange (anticorps anti-RECA, marqueur endothelial). Discussion La CEPO pourrait diminuer l’œdeme post-TC (en imagerie) grâce a une augmentation de l’expression des AQP4 (observee en RT-PCR et IF). Cela pourrait s’accompagner d’une relocalisation des AQP4 au plus pres de la barriere hemato-encephalique le long des pieds astrocytaires et favoriserait ainsi la sortie de l’eau des cellules [3] . Ces experimentations sont a completer en IF par un co-marquage vasculaire, AQP4 et astrocytaire, en cours. |
