دورية أكاديمية
Incubación, pre-lisis y post-purificación en el rendimiento y pureza de ácidos nucleicos extraídos de sangre de cabras domésticas contenida en tarjetas FTA
| العنوان: | Incubación, pre-lisis y post-purificación en el rendimiento y pureza de ácidos nucleicos extraídos de sangre de cabras domésticas contenida en tarjetas FTA |
|---|---|
| المؤلفون: | Carolina Sancho-Blanco, Esteban J. Jiménez-Alfaro, Ramón Molina-Bravo, Rodolfo Umaña-Castro |
| المصدر: | Revista Mexicana de Ciencias Pecuarias, Vol 13, Iss 1 (2022) |
| بيانات النشر: | Instituto Nacional del Investigaciones Forestales, Agrícolas y Pecuarias, 2022. |
| سنة النشر: | 2022 |
| المجموعة: | LCC:Animal culture LCC:Veterinary medicine |
| مصطلحات موضوعية: | ADN, Columnas de sílice, CTAB, Fenol-cloroformo, Chelex, PCR, Animal culture, SF1-1100, Veterinary medicine, SF600-1100 |
| الوصف: | Técnicas moleculares requieren extracciones de ácidos nucleicos en cantidad y pureza adecuadas. Este trabajo describe un modelo lineal generalizado (GLM) de un factor ajustado con efectos fijos sobre el rendimiento de ácido nucleico (ng/μl) y la pureza (A260/A280 y A260/A230), para cinco métodos de extracción de ADN utilizando tarjetas FTA con sangre de cabra (Capra aegagrus hircus). Se ensayaron dos métodos comerciales basados en columnas de sílice (Invitrogen y Macherey Nagel; MN), método resina quelante (Chelex), método CTAB y el método de fenol-cloroformo-alcohol isoamílico (PCI). Adicionalmente, para MN, se evaluó una etapa de incubación con tampón PBS (Phosphate Buffered Saline) en alta temperatura previa a la lisis y una etapa de purificación posterior a la extracción utilizando un modelo de efecto fijo de dos factores con interacción. Las concentraciones de ADN y las proporciones de pureza fueron variables; la concentración más alta se obtuvo con el kit MN (170.45 ng/μl), pero con deficiencias en la pureza (0.32 de A260/A230, 0.34 de A260/A280). A pesar de esto, todos los métodos de extracción generaron productos PCR con cebadores específicos D-loop (ADNmt). El efecto combinado de las etapas de pre-incubación y post-purificación arrojó valores de pureza satisfactorios (1.89 para A260/A230 y 1.65 para A260/A280), así como relaciones de concentración (476.78 ng/μl) con baja variabilidad. En conclusión, la concentración y pureza del ADN de muestras de sangre mejora considerablemente cuando se usa un kit comercial en combinación con incubación previa a la lisis y purificación posterior a la extracción. Estos ácidos nucleicos se sugieren para uso en potenciales aplicaciones moleculares a posteriori. |
| نوع الوثيقة: | article |
| وصف الملف: | electronic resource |
| اللغة: | English Spanish; Castilian |
| تدمد: | 2007-1124 2448-6698 |
| Relation: | http://177.242.149.223/index.php/Pecuarias/article/view/5890; https://doaj.org/toc/2007-1124; https://doaj.org/toc/2448-6698 |
| DOI: | 10.22319/rmcp.v13i1.5890 |
| URL الوصول: | https://doaj.org/article/6457fcd8bcbd405fa17210b96781244f |
| رقم الأكسشن: | edsdoj.6457fcd8bcbd405fa17210b96781244f |
| قاعدة البيانات: | Directory of Open Access Journals |
Full Text Finder | تدمد: | 20071124 24486698 |
|---|---|
| DOI: | 10.22319/rmcp.v13i1.5890 |